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Pseudomonas syringae pv. eriobotryaeプラスミド上の病原性遺伝子psvAの分離と解析
http://hdl.handle.net/10458/2522
http://hdl.handle.net/10458/2522ec0f8bde-bce9-45e5-9d1c-c9dca209dcfc
| 名前 / ファイル | ライセンス | アクション |
|---|---|---|
kamiunten-2522.pdf (1.8 MB)
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| Item type | 学術雑誌論文 / Journal Article(1) | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 公開日 | 2010-02-19 | |||||
| タイトル | ||||||
| タイトル | Isolation and Characterization of Virulence Gene psvA on a Plasmid of Pseudomonas syringae pv. eriobotryae | |||||
| 言語 | en | |||||
| タイトル | ||||||
| タイトル | Pseudomonas syringae pv. eriobotryaeプラスミド上の病原性遺伝子psvAの分離と解析 | |||||
| 言語 | ja | |||||
| 言語 | ||||||
| 言語 | eng | |||||
| キーワード | ||||||
| 言語 | en | |||||
| 主題Scheme | Other | |||||
| キーワード | virulence gene psvA, nucleotide sequence, Pseudomonas syringae pv. eriobotryae | |||||
| 資源タイプ | ||||||
| 資源タイプ | journal article | |||||
| 著者 |
上運天, 博
× 上運天, 博 |
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| 抄録 | ||||||
| 内容記述タイプ | Abstract | |||||
| 内容記述 | A pLAFR3 cosmid clone, pVIR6, which contains a virulence gene in the 23-kb insert DNA, was previously constructed. This virulence gene originated from the 52 Mdal plasmid of Pseudomonas syringae pv. eriobotryae. Serial deletion analyses of pVIR6 indicated that ca. 7 kb of the insert DNA restored pathogenicity to an avirulent PEO strain, and the deletion plasmid was designated as pKPN35. A 6961-bp insert DNA of pKPN35 was sequenced, and four possible reading frames （ORF1 480 bp; ORF2 969 bp ; ORF3 2193 bp ; ORF4 516 bp） were found in tandem. ORF1 and ORF4 had no significant homology to known genes. ORF2 had an amino acid sequence similar to the transposase of IS5 of E. coli. A recombinant plasmid pNSF1 containing only the ORF3 region restored pathogenicity to the avirulent PEO strain. However, an ORF3 mutant of pNSF1, which was constructed by deleting a 580-bp BssHII segment from ORF3, failed to restore virulence to the same strain. Consequently, ORF3 was identified as a virulence gene and was named psvA. A HrpL-dependent promoter consensus sequence was found upstream of psvA. The psvA gene product was 731 amino acids long and had a predicted molecular mass of 83.2 kDa. The deduced protein of the psvA gene showed no significant similarity to any protein sequence in the data base, although it had some similarity to the N-terminal region of the avrA gene in Pseudomonas syringae pv. glycinea. Production of the deduced protein of the psvA gene was confirmed in E. coli by using the expression vector pET-3a. Southern hybridization analysis indicated that the psvA gene was conserved in P. syringae pathovars myricae and dendropanacis which are causal agents of woody plant galls in Japan. | |||||
| 言語 | en | |||||
| 抄録 | ||||||
| 内容記述タイプ | Abstract | |||||
| 内容記述 | ビワがんしゅ病菌（Pseudomonas syringae pv. eribotryae）の52Mdalプラスミド由来の病原性遺伝子を含むDNA断片（23kb）をpLAFR3に挿入して得られたpVIR6から病原性遺伝子を単離するためサブクローニングや欠失を試みた。その結果,挿入断片が約7kbで,病原性を有するpKPN35が得られた。この挿入断片の塩基配列を調べた結果,全長が6961bpで,4つのオープンリーディングフレーム（OPF）の存在が示唆された。ORF1（480Bp）とORF4（516bp）は既知の遺伝子と相同性はなかった。ORF2（969bp）の塩基配列から想定されるアミノ酸配列は大腸菌IS5のトランスポザーゼと相同性が認められた。ORF3（2193bp）領域のみを含むpNSF1は52Mdalプラスミドが欠落し,病原性を失ったビワがんしゅ病菌PE0に病原性を回復させた。しかし,pNSF1のORF3から580bpのBassHII断片を欠失させたプラスミドは病原性を回復させることはできなかった。以上の結果はORF3が病原性遺伝子であることを示しており,psvAと命名した。psvAの上流にはHrpLdependent promoterの共通配列が認められた。psvAの塩基配列から想定されるタンパク質psvAは731のアミノ酸からなり,その分子量は83.2kDaであった。psvAは既知のタンパク質と相同性は認められなかったが,Pseudomonas syringae pv. glycineaのavrA遺伝子のN末端領域との相同性が認められた。psvAを発現用ベクターpET-3aに組み込み,大腸菌でのタンパク質発現を調べた結果,pavAの想定分子量とほぼ同じ分子量を有するタンパク質の発現が認められた。サザンハイブリダイゼーション分析により,psvAがヤマモモこぶ病菌（P.syringae pv. myricae）とカクレミノこぶ病菌（P. syringae pv. dendropanacis）にも保持されていることが明らかになった。 | |||||
| 言語 | ja | |||||
| 書誌情報 |
ja : 日本植物病理学会報 en : Annals of the Phytopathological Society of Japan 巻 65, 号 5, p. 501-509, 発行日 1999-10-25 |
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| 出版者 | ||||||
| 出版者 | 日本植物病理学会 | |||||
| 言語 | ja | |||||
| 出版者 | ||||||
| 出版者 | The Phytopathological Society of Japan (PSJ) | |||||
| 言語 | en | |||||
| ISSN | ||||||
| 収録物識別子タイプ | ISSN | |||||
| 収録物識別子 | 00319473 | |||||
| 書誌レコードID | ||||||
| 収録物識別子タイプ | NCID | |||||
| 収録物識別子 | AN0019269X | |||||
| 他の資源との関係 | ||||||
| 関連名称 | http://ci.nii.ac.jp/naid/110002733549 | |||||
| 著者版フラグ | ||||||
| 出版タイプ | VoR | |||||
