@article{oai:miyazaki-u.repo.nii.ac.jp:00003227, author = {中村, 豊彦 and Nakamura, Toyohiko and 倉盛, 宏一 and 在田, 典弘 and Zaita, Norihiro and 秋元, 秀俊 and Akimoto, Hidetoshi and 太田, 一良 and Ohta, Kazuyoshi and Kuramori, Koichi and 在田, 典弘 and Zaita, Norihiro and 秋元, 秀俊 and Akimoto, Hidetoshi}, issue = {1-2}, journal = {宮崎大学農学部研究報告, Bulletin of the Faculty of Agriculture, Miyazaki University}, month = {Dec}, note = {Exo- and endoinulinases were extracted from mycelia of Aspergillus niger strain 12 using quartz sand and purified by DEAE-Cellulofine A-500, Sephadex G-1OO, and Sephadex G-200 chromatographies. The intracellular enzymes were homogeneous as judged by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The purified exoinulinase P-II had specific activities of 6.6 U/mg toward inulin and 22 U/mg toward sucrose. The endoinulinase P-III showed 108 U/mg toward inulin, but no activity toward sucrose. Mrs of exoinulinase P-II and endoinulinase P-III were determined by gel filtration using Sephadex G-200 as 47 and 56 kDa, respectively. Optimal pH and temperature for enzyme activity were pH-5.0 and 55 ℃ for P-II, and pH 5.3 and 45℃ for P-III. Both the enzymes were activated by Mn2+ , and inactivated by Ag+, Hg2+, or p-chloromercuribenzoate. Inulinases P-II and P-III exhibited apparent Km values of 5.8 and 0.80 mM, respectively., 黒麹菌Aspergillus nigerNo.12株の培養菌体を石英砂で破砕し,その抽出液から細胞内エキソおよびエンド型イヌリナーゼをDEAE-セルロファインA-500,続いてセファデックスG-100およびG-200クロマトグラフィーによりそれぞれ電気泳動的に単一に精製した。エキソ型イヌリナーゼP-IIの比活性は,イヌリンに対して6.6U/mg,ショ糖に対して22U/mgであった。エンド型イヌリナーゼP-IIIはイヌリンのみに作用し,比活性は108U/mgであった。 ゲルろ過で測定した分子量は,エキゾ型イヌリナーゼP-IIが47kDa,エンド型イヌリナーゼP-IIIが56kDaであった。エキソ型イヌリナーゼP-IIとエンド型イヌリナーゼP-IIIの最適pHはそれぞれpH5.0とpH5.3,最適温度はそれぞれ55℃と45℃であった。両酵素ともMn2+で賦活化され,Ag+,Hg2+,p-クロロメルクリ安息香酸で失活した。エキソ型イヌリナーゼP-IIとエンド型イヌリナーゼP-IIIのイヌリンに対するMichaelis定数(Km)は,それぞれ5.8mMと0.80mMであった。}, pages = {49--58}, title = {Purification and Properties of Intracellular Exo- and Endoinlulinases from Aspergillus niger Strain 12}, volume = {48}, year = {2001}, yomi = {ナカムラ, トヨヒコ and クロモリ, コウイチ and ザイタ, ノリヒロ and アキモト, ヒデトシ and オオタ, カズヨシ and ザイタ, ノリヒロ and アキモト, ヒデトシ} }