2026-03-06T14:44:27Z https://miyazaki-u.repo.nii.ac.jp/oai

oai:miyazaki-u.repo.nii.ac.jp:00002102 2024-12-03T06:50:12Z 85 85:33

多糖キシランを分解する遺伝子組換え酵母 太田, 一良 2632 オオタ, カズヨシ Ohta, Kazuyoshi カビの一種Aureobasidium pullulans var. melanigenum ATCC 20524株は活性の至適pHが2.0である好酸性キシラナーゼを産生する。今年度は、メタノール資化性酵母Pichia pastoris GS115株による本酵素の発現と分泌を目的とした。キシランを炭素源とする液体培地で増殖させた本キシラナーゼ生産菌株の培養菌体からmRNAを調製した。このmRNAから、RT-PCRによりキシラナーゼをコードするcDNAを合成した。シグナル配列がそれぞれ本酵素自身のもの、Saccharomyces cerevisiae のα-ファクター、P.pastoris のPHO1となるようにキシラナーゼcDNAを染色体組込み型の3種の分泌発現ベクターpPIC3.5、pPIC9、およびpHIL-S1(インビトロ-ゲン社)に挿入し、P.pastorisを形質転換した。これら形質転換体を30℃ でメタノールにより遺伝子の発現を誘導しながら液体培養で増殖させた結果、細胞外にキシラナーゼを効率よく分泌した。 research report VoR application/pdf https://miyazaki-u.repo.nii.ac.jp/record/2102/files/ohta2-chiiki-2003.pdf http://hdl.handle.net/10458/1720 https://miyazaki-u.repo.nii.ac.jp/records/2102 jpn